P741H - Набор для обнаружения нуклеиновых кислот SARS-CoV-2

SARS-CoV-2 Набор для обнаружения нуклеиновых кислот (метод ОТ-ПЦР в реальном времени)

Предполагаемое использование:

ТианЛонгНабор для обнаружения нуклеиновых кислот SARS-CoV-2предназначен для качественного обнаружения нуклеиновой кислоты SARS-CoV-2 методом полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией в реальном времени (RT-PCR в реальном времени).

Тест предназначен для обнаружения РНК SARS-CoV-2 в таких образцах, как мазки из носоглотки или ротоглотки, взятые у отдельных сотрудников на основании клинических и/или эпидемиологических критериев. Другие типы проб из верхних и нижних дыхательных путей (такие как мокрота, аспираты из нижних дыхательных путей, бронхоальвеолярный лаваж и смывы/аспираты из носоглотки или носовые аспираты), а также образцы, собранные из окружающей среды, также могут служить цели обнаружения вируса, если адекватная РНК SARS-CoV-2 может быть извлечена из образцов.

Анализ предназначен для нацеливания на хорошо консервативные области генов РНК-зависимой РНК-полимеразы (RdRp) и N-белка для наиболее стабильной работы анализа в ходе развития эпидемии, несмотря на склонность РНК-вирусов к мутациям.

Разработаны специальные наборы праймеров и зондов TaqMan с хорошей устойчивостью к известным штаммам вируса и потенциально развивающимся мутациям вируса SARS-CoV-2. Нуклеиновые кислоты извлекаются из определенных образцов с помощью соответствующих методов и материалов. После обратной транскрипции представленные последовательности-мишени RdRp и N будут амплифицированы соответствующими специфическими праймерами и обнаружены зондами TaqMan. Во время фазы удлинения каждого цикла ПЦР полимераза Taq отщепляет репортерный краситель от 5'-конца зонда, отделяет краситель от гасителя, производя флуоресцентные сигналы. Нарастающие сигналы флуоресценции обнаруживаются в ходе ПЦР, и данные анализируются.

Конкретный набор праймеров и зондов предназначен для человеческого гена домашнего хозяйства GAPD, который служит внутренним контролем (IC) для этого анализа. GAPD постоянно экспрессируется в клетках человека, которые присутствуют в образцах, предназначенных для анализа. Возникновение ложноотрицательных результатов из-за проблем с качеством образца и/или процессом экстракции можно эффективно отслеживать и контролировать.

Для каждого из генов RdRP, N и внутреннего контроля SARS-CoV-2 выбирается один набор гасителей флуоресценции, а соответствующие каналы обнаружения флуоресценции назначаются для соответствующей мишени. Оптимизированная реакция тройной ОТ-ПЦР в реальном времени для каждого образца выполняется в одной пробирке. Обнаружение представленной нуклеиновой кислоты SARS-CoV-2 осуществляется в полностью автоматической закрытой реакционной системе RT-PCR в реальном времени.

Все реагенты следует хранить при температуре от –25°C до –15°C в незамерзающем морозильнике для использования до истечения срока годности. Следует избегать замораживания/оттаивания более трех раз в течение периода использования набора. Реагенты должны транспортироваться при температуре от -25°C до 8°C.

Рекомендуется использовать набор для обнаружения с термоциклерами для ПЦР в реальном времени с соответствующими каналами считывания флуоресценции для красителей FAM, VIC (HEX), Cy5, например, системы ПЦР в реальном времени Applied Biosystems™ 7500, системы ПЦР в реальном времени TianLong Gentier, и т.п.